ABSTRACT
Objective : The Brazilian population has heterogeneous ethnicity. No previous study evaluated NR3C1 polymorphisms in a Brazilian healthy population. Materials and methods : We assessed NR3C1 polymorphisms in Brazilians of Caucasian, African and Asian ancestry (n = 380). In a subgroup (n = 40), we compared the genotypes to glucocorticoid (GC) sensitivity, which was previously evaluated by plasma (PF) and salivary (SF) cortisol after dexamethasone (DEX) suppression tests, GC receptor binding affinity (K d ), and DEX-50% inhibition (IC 50 ) of concanavalin-A-stimulated mononuclear cell proliferation. p.N363S (rs6195), p.ER22/23EK (rs6189-6190), and BclI (rs41423247) allelic discrimination was performed by Real-Time PCR (Polymerase Chain Reaction). Exons 3 to 9 and exon/intron boundaries were amplified by PCR and sequenced. Results : Genotypic frequencies (%) were: rs6195 (n = 380; AA:96.6/AG:3.14/GG:0.26), rs6189-6190 (n = 264; GG:99.6/GA:0.4), rs41423247 (n = 264; CC:57.9/CG:34.1/GG:8.0), rs6188 (n = 155; GG:69.6/GT:25.7/TT:4.7), rs258751 (n = 150; CC:88.0/CT:10.7/TT:1.3), rs6196 (n = 176; TT:77.2/TC:20.4/CC:2.4), rs67300719 (n = 137; CC:99.3/CT:0.7), and rs72542757 (n = 137; CC:99.3/CG:0.7). The rs67300719 and rs72542757 were found only in Asian descendants, in whom p.N363S and p.ER22/23EK were absent. The p.ER22/23EK was observed exclusively in Caucasian descendants. Hardy-Weinberg equilibrium was observed, except in the Asian for rs6188 and rs258751, and in the African for p.N363S. The K d , IC 50 , baseline and after DEX PF or SF did not differ between genotype groups. However, the mean DEX dose that suppressed PF or SF differed among the BclI genotypes (P = 0.03). DEX dose was higher in GG- (0.7 ± 0.2 mg) compared to GC- (0.47 ± 0.2 mg) and CC-carriers (0.47 ± 0.1 mg). Conclusion : The genotypic frequencies of NR3C1 polymorphisms in Brazilians are similar to worldwide populations. Additionally, the BclI polymorphism ...
Objetivo : Este estudo avalia polimorfismos (SNPs) do NR3C1 na população brasileira, que possui origem étnica heterogênea. Materiais e métodos : SNPs do NR3C1 foram avaliados em brasileiros de ancestralidade caucasiana, africana ou japonesa (n = 380). Em um subgrupo (n = 40), os genótipos foram comparados à sensibilidade aos glicocorticoides (GC), previamente avaliada por cortisol plasmático (PF) e salivar (SF) após supressão com dexametasona (DEX), ensaio de afinidade do receptor ao GC (K d ) e inibição por DEX de 50% da proliferação de mononucleares estimulada por concanavalina-A (IC 50 ). Discriminação alélica de p.N363S (rs6195), p.ER22/23EK (rs6189-6190) e BclI (rs41423247) foi realizada por PCR em tempo real. Éxons 3 a 9 e transições éxon/íntron foram amplificados e sequenciados. Resultados : Frequências genotípicas (%) foram: rs6195 (n = 380; AA:96,6/AG:3,14/GG:0,26), rs6189-6190 (n = 264; GG:99,6/GA:0,4), rs41423247 (n = 264; CC:57,9/CG:34,1/GG:8,0), rs6188 (n = 155; GG:69,6/GT:25,7/TT:4,7), rs258751 (n = 150; CC:88,0/CT:10,7/TT:1,3), rs6196 (n = 176; TT:77,2/TC:20,4/CC:2,4), rs67300719 (n = 137; CC:99,3/CT:0,7), e rs72542757 (n = 137; CC:99,3/CG:0,7). Enquanto rs67300719 e rs72542757 foram exclusivos dos nipodescendentes, p.N363S e p.ER22/23EK estavam ausentes nesses indivíduos. p.ER22/23EK foi exclusivo dos descendentes de caucasianos. Equilíbrio de Hardy-Weinberg foi observado, exceto nos nipodescendentes para rs6188 e rs258751 e nos afrodescendentes para p.N363S. K d , IC 50 , PF ou SF basal ou após DEX foram semelhantes entre os genótipos. Entretanto, a dose média de DEX que suprimiu PF ou SF diferiu entre os genótipos BclI (P = 0,03), sendo maior nos carreadores GG (0,7 ± 0,2 mg) comparada aos GC (0,47 ± 0,2 mg) e CC (0,47 ± 0,1 mg). Conclusão : As ...
Subject(s)
Adult , Female , Humans , Male , Young Adult , Black People/genetics , Asian People/genetics , White People/genetics , Metabolism, Inborn Errors/genetics , Polymorphism, Genetic/drug effects , Receptors, Glucocorticoid/deficiency , Anti-Inflammatory Agents/pharmacology , Brazil/ethnology , Cell Proliferation/drug effects , Dexamethasone/pharmacology , Gene Frequency , Genetic Association Studies , Hydrocortisone/blood , Hydrocortisone , Leukocytes, Mononuclear/drug effects , Polymorphism, Single Nucleotide , Receptors, Glucocorticoid/genetics , Sequence Analysis, DNAABSTRACT
OBJECTIVES: Idiopathic central precocious puberty and its postponement with a (gonadotropin-releasing hormone) GnRH agonist are complex conditions, the final effects of which on bone mass are difficult to define. We evaluated bone mass, body composition, and bone remodeling in two groups of girls with idiopathic central precocious puberty, namely one group that was assessed at diagnosis and a second group that was assessed three years after GnRH agonist treatment. METHODS: The precocious puberty diagnosis and precocious puberty treatment groups consisted of 12 girls matched for age and weight to corresponding control groups of 12 (CD) and 14 (CT) girls, respectively. Bone mineral density and body composition were assessed by dual X-ray absorptiometry. Lumbar spine bone mineral density was estimated after correction for bone age and the mathematical calculation of volumetric bone mineral density. CONEP: CAAE-0311.0.004.000-06. RESULTS: Lumbar spine bone mineral density was slightly increased in individuals diagnosed with precocious puberty compared with controls; however, after correction for bone age, this tendency disappeared (CD = -0.74 + 0.9 vs. precocious puberty diagnosis = -1.73 + 1.2). The bone mineral density values of girls in the precocious puberty treatment group did not differ from those observed in the CT group. CONCLUSION: There is an increase in bone mineral density in girls diagnosed with idiopathic central precocious puberty. Our data indicate that the increase in bone mineral density in girls with idiopathic central precocious puberty is insufficient to compensate for the marked advancement in bone age observed at diagnosis. GnRH agonist treatment seems to have no detrimental effect on bone mineral density.
Subject(s)
Adolescent , Child , Female , Humans , Young Adult , Body Composition/physiology , Bone Density/physiology , Gonadotropin-Releasing Hormone/agonists , Puberty, Precocious/drug therapy , Puberty, Precocious/pathology , Absorptiometry, Photon , Age Factors , Body Mass Index , Body Composition/drug effects , Bone Density/drug effects , Case-Control Studies , Reference Values , Statistics, Nonparametric , Treatment OutcomeABSTRACT
Tumores do córtex adrenal (TCA) são mais frequentes em crianças, mas podem ocorrer em qualquer faixa etária. São classificados como funcionantes, não funcionantes (predominam no adulto), e mistos. O diagnóstico é baseado na avaliação clínica, hormonal e exames de imagem. Em crianças, o método de escolha para diferenciar entre benigno ou maligno é a classificação baseada no estadiamento do tumor. Alguns marcadores moleculares merecem destaque: além de mutações inativadoras no gene supressor tumoral TP53, há evidências de envolvimento do IGF2 em 90 por cento de TAC malignos, e mutações no éxon 3 do gene CTNNB1 foram encontradas em 6 por cento dos TAC pediátricos. Além disso, microRNAs podem atuar como reguladores negativos da expressão gênica e participar da tumorigênese adrenocortical. Métodos para análise da expressão gênica permitem identificar TCA com prognóstico bom ou ruim, e espera-se que esses estudos possam facilitar o desenvolvimento de drogas para tratar pacientes de acordo com as vias de sinalização específicas que estiverem alteradas.
Adrenocortical tumors (ACT) are more frequent during childhood, but they can appear at any age. ACTs can be classified in functioning, nonfunctioning (mainly observed in adults) and mixed. The diagnosis is based on clinical, biochemical findings and imaging. In children, in order to classify ACT as benign or malignant, tumor staging classification is recommended. Regarding molecular markers some studies should be taken into account: besides TP53 mutations, previous studies have also provided evidences of IGF2 involvement in 90 percent of the malignant ACT. Mutations altering exon 3 of CTNNB1 gene have been found in 6 percent of childhood ACTs. In addition, microRNAs can act as negative regulators of gene expression by targeting mRNA controlling cell growth, differentiation and apoptosis and have been implicated in adrenal tumorigenesis. High-throughput methods to analyze genome-wide expression have been developed over the last decade and identified a subset of tumors with good or poor prognosis. In the future, these studies can provide the basis of specific drug development, which can treat patients according to specific altered signaling pathway.
Subject(s)
Child , Humans , Adrenal Cortex Neoplasms/diagnosis , Adrenocortical Adenoma/diagnosis , Adrenocortical Carcinoma/diagnosis , Adrenal Cortex Neoplasms/genetics , Adrenocortical Adenoma/genetics , Adrenocortical Carcinoma/genetics , Gene Expression Regulation, Neoplastic/genetics , Mutation/genetics , Biomarkers, Tumor/genetics , beta Catenin/geneticsABSTRACT
Pseudo-hipoaldosteronismo tipo 1 (PHA1) é uma doença genética rara, caracterizada por vômitos, desidratação, baixo ganho pôndero-estatural e perda urinária de sal no período neonatal. Indivíduos afetados apresentam hiponatremia, hipercalemia, aumento da atividade de renina plasmática e concentrações muito elevadas de aldosterona plasmática, secundárias a uma resistência renal ou sistêmica à aldosterona. A forma sistêmica do PHA1 é a mais grave, havendo necessidade de reposição de doses altas de NaCl. Os sintomas persistem por toda a vida. Mutações inativadoras nos genes codificadores das sub-unidades do canal de sódio sensível à amilorida (ENaC) em homozigose ou heterozigose composta são responsáveis pelo quadro clínico de PHA1 sistêmico. A forma renal do PHA1 tem apresentação clínica mais leve, com necessidade de suplementação de doses baixas de NaCl. Os sintomas regridem no final do primeiro ano de vida. Mutações inativadoras do gene do receptor do mineralocorticóide (MR) estão associadas à forma renal do PHA1 em várias famílias afetadas. O padrão de herança é autossômico dominante, entretanto casos esporádicos têm sido relatados. No presente trabalho, discutimos as ações e os mecanismos de ação da aldosterona, e os aspectos clínicos e fisiopatológicos envolvidos nas síndromes de resistência aos mineralocorticóides. Adicionalmente, os aspectos clínicos e moleculares de uma família brasileira com PHA1 secundário à mutação R947X no gene do MR são discutidos.
Pseudohypoaldosteronism type 1 (PHA1) is a rare genetic disease characterized by neonatal renal salt wasting, vomiting, dehydration and failure to thrive. Affected patients present hyponatremia, hyperkalemia, associated with high levels of plasma renin and aldosterone resulting from a renal or systemic resistance to aldosterone. The systemic form of PHA1 results in a severe phenotype, and high doses of salt supplementation are necessary. The symptoms are life-long recurrent. This form is associated with autosomal recessive transmission. Homozygous or compound heterozygous loss of function mutations in the genes coding for the epithelial sodium channel (ENaC) subunities are responsible for this disease. The renal form of PHA1 results in a mild phenotype. Low doses of salt supplementation are required and usually the symptoms remit at the end of the first year of life. Heterozygous loss-of-function mutations in the mineralocorticoid receptor (MR) gene are associated with the renal form of PHA1 in the majority of the affected families but sporadic cases have been reported. In this review the mechanisms of aldosterone action and its effects are discussed. Additionally, clinical and molecular findings of a Brazilian family with the renal form of PHA1 caused by a nonsense mutation (R947X) in the MR gene are presented.
Subject(s)
Humans , Infant, Newborn , Male , Aldosterone/blood , Pseudohypoaldosteronism/genetics , Receptors, Mineralocorticoid/genetics , Aldosterone/physiology , Epithelial Sodium Channels/genetics , Mutation , Pedigree , Pseudohypoaldosteronism/metabolism , Pseudohypoaldosteronism/physiopathology , Receptors, Mineralocorticoid/metabolism , Transcription, GeneticABSTRACT
A AIMAH é caracterizada pela presença de macronódulos em ambas as adrenais, na ausência da estimulação do ACTH. Habitualmente, as manifestações clínicas aparecem somente após várias décadas de vida, provavelmente em função da baixa atividade esteroidogênica do tecido hiperplásico. Entretanto, em indivíduos assintomáticos cuja AIMAH foi descoberta acidentalmente, o eixo HHA já se encontra alterado. Estudos têm demonstrado que, na maioria dos casos de AIMAH, a secreção de cortisol é regulada de modo "aberrante" por hormônios como o GIP, AVP, catecolaminas, LH/hCG e serotonina, através de seus respectivos receptores, ectópicos ou eutópicos, porém aberrantemente acoplados à esteroidogênese. Os mecanismos moleculares responsáveis pela expressão ectópica dos receptores hormonais e/ou de seu acoplamento anormal à esteroidogênese adrenal ainda são pouco conhecidos. Embora a expressão aberrante destes receptores hormonais possa desempenhar um papel importante na iniciação da proliferação celular aumentada, bem como na esteroidogênese, é provável que eventos genéticos adicionais ocorram, envolvendo a regulação do ciclo celular, adesão e transcrição. Mutações no gene GNAS1 não associadas à síndrome de McCune-Albright podem ser encontradas em raros casos de AIMAH. Em alguns casos, a presença de receptor hormonal aberrante abre novas possibilidades de tratamento farmacológico específico do hipercortisolismo, seja isolado ou associado à adrenalectomia unilateral.
Subject(s)
Humans , Adrenal Glands/pathology , Adrenocorticotropic Hormone , Adrenal Glands/physiopathology , Cushing Syndrome/drug therapy , Cushing Syndrome/physiopathology , GTP-Binding Protein alpha Subunits, Gs/genetics , Hyperplasia/genetics , Hyperplasia/physiopathology , Mutation , Signal Transduction , Vasopressins/therapeutic useABSTRACT
Os corticotrofinomas representam aproximadamente 80 por cento dos casos de síndrome de Cushing de origem endógena em adultos. Na última década, foram feitos avanços consideráveis na compreensäo do desenvolvimento da hipófise anterior, na patogênese dos tumores hipofisários e nos fatores envolvidos na progressäo tumoral. A aplicaçäo do conceito geral de tumorigênese é adequada aos tumores corticotróficos, sendo este um processo que envolve várias etapas, resultantes da interaçäo de eventos iniciadores e subseqüentemente de fatores promotores, sendo portanto multifatorial. De modo geral, oncogenes e genes de supressäo tumoral freqüentemente relacionados a outros tipos de tumores näo parecem contribuir neste processo, embora alteraçäo na expressäo de alguns destes genes, como p53, plb e PTTG, possa estar relacionada a um comportamento fenotípico mais agressivo. A investigaçäo das vias regulatórias específicas dos corticotrofos, principalmente a estrutura e a expressäo dos genes dos receptores do CRH, AVP e GR também näo evidenciou a presença de mutações. Entretanto, é possível que alterações em regiões promotoras ou em co-fatores que regulam estes genes possam estar presentes. Estudos futuros sobres os mecanismos de regulaçäo da célula corticotrófica normal e tumoral deveräo contribuir na definiçäo de marcadores prognósticos e no desenvolvimento de novas modalidades de tratamento.
Subject(s)
Humans , Pituitary Neoplasms , Cushing Syndrome/genetics , Adrenocorticotropic Hormone , Apoptosis , Cytokines , Genes, Regulator , Growth Substances , Methylation , Mutation , OncogenesABSTRACT
O gene humano do receptor de glicocorticóide (hRG) apresenta duas isoformas, a clássica alpha e a beta, produzidas por um "splicing" alternativo de um único gene, no cromossomo 5. Estas isoformas possuem os primeiros oito exons em comum, diferindo no exon 9. Esta diferença torna a isoforma beta incapaz de ligar-se aos glicocorticóides e de ativar a transcrição dos genes responsivos a eles. A isoforma beta é um inibidor dominante negativo da isoforma alpha e regula a sensibilidade endógena aos glicocorticóides. A síndrome de resistência generalizada aos glicocorticóides caracteriza-se pela hipossensibilidade de todos os tecidos do organismo ao cortisol. A retroalimentação negativa ao nível do eixo hipotálamo-hipofisário encontra-se comprometida, resultando em elevadas concentrações de ACTH, com conseqüente elevação do cortisol, hipersecreção de mineralocorticóides e andrógenos. As manifestações clínicas variam desde pacientes assintomáticos ou com queixas sutis de fadiga crônica até hipertensão e alcalose hipocalêmica, secundárias ao hipermineralocorticismo, virilização na mulher (acne, hirsutismo, oligomenorréia, oligo-anovulação e infertilidade), adrenarca precoce na criança e alterações na espermatogênese no homem, secundários ao hiperandrogenismo. Estudos funcionais dos RGs demonstram diminuição da afinidade ou do número deste receptores. Diferentes alterações moleculares como mutações puntiformes e microdeleções, com conseqüente redução da expressão da proteína do RG ou da afinidade dos RG, têm sido descritas e parecem causar resistência aos glicocorticóides. O tratamento requer a administração de doses elevadas de glicocorticóides para suprimir a hipersecreção de ACTH, diminuindo, conseqüentemente, a secreção de cortisol, mineralocorticóides e andrógenos.